医学泰斗

孙明就像个路过的npc，丢几句毫无杀伤力的台词后就自己退场了。

关于无能的丈夫这一块……

陈浩还要说：“好像看见孙教授关门的时候捂着，不会有事吧？”

易向晚：“没事，应当是受了伤，回去休养几天就好了，咱们继续工作吧。”

陈浩和易向晚，人走了还要补刀！

而且刚才正是陈浩一脸无辜地提字字诛心的问题。

这个陈浩，怎么这么坏啊！

……

重新开始实验。

nanodrop上几组数据都很完。

王晓晴乖巧请教：“江河，接来怎么？”

目前度和纯度虽然达标了，但irna片段太短。

传统的逆转录实验，一般都是用oligo(dt)引去抓rna尾上的poly-a结构。

可是irna本没有这尾，常规的逆转录引本抓不住它。

这在08年又是一个技术难题。

全世界的实验室都在寻找一效特异的办法，把这短短二十几个碱基的片段给稳定地逆转录来。

江河：“之前讲过环引，当然，后组的组员来得晚不知，陈浩，你给大家简单讲讲。”

“ok啊。”

陈浩：“这个引分为两分，后面是一个能够自我互补打折形成的环结构，它的作用是提供空间位阻，增加稳定；前面伸来一小段，大概6到8个碱基，这段序列和我们要抓的特异irna的3端完全互补。”

王晓晴：“明白了，引前端这几个碱基先跟irna的尾准结合，然后逆转录酶就可以用这个双链结构作为起始，一路把irna的互补链给合成来。”

杨煦很想嘴装。

可这一段江河还没教他。

他也不会啊。

只能悻悻放弃。

陈浩则觉很。

——没想到吧！自己也有给教授上课的一天！

他笑了笑，接着说：

“不仅如此，环结构在室温是折叠闭合的，只有在结合了目标irna后才会打开，这会极大降低引结合到其他杂质rna上的概率，特异会呈指数级上升。”

陆晓林补充：“对了，引序列老大已经设计好了，今天早上刚送到。”

他拉开旁边的一个屉，拿一排装在冰盒里的离心。

江河看了，：“现在置逆转录系，16度30分钟让引结合，42度30分钟逆转录，最后85度5分钟灭活酶。”

“收到！”

一个多小时后。

逆转录程序跑完，酶被灭活。

接来是最张的验证环节。

上机，跑qpcr（实时荧光定量pcr）。

众人屏息凝神，迅速好荧光定量系，将满载着希望的八排放了旁边那台abi 7500定量pcr仪中。

显示。

第18个循环。

荧光信号突然爆发，拉了一完平的扩增曲线！

一个多小时后，40个扩增循环全结束，机最后的升温阶段。

接着跑来的熔解曲线，呈现极为漂亮的单一峰型！

这意味着，

江河团队极其准地抓住了irna，并成功将其逆转录！

实验室里爆发一阵呼。

其实项目推到这里，就已经可以向外发论文了，光是这一步，都是非常了不起的一步！

江河脑海中的度条再次往上狠涨十个百分

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