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第164章 实验正式开始(1/3)

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实验正式开始

江河今日,提前班。

医院这边的弹,且让它先飞一会儿。

回学校推科研项目去。

重症急胰炎的论文已经发,接来的重戏,是irna早筛。

这玩意来,是真正能撼动全世界的武,更是他前世今生执念的所在:

——攻克胰癌,从极早期的准筛查开始。

返回南医大的公车,江河在项目组的qq群里发了一条消息。

“所有人,一小时后,实验室开会。”

实验室。

江河去的时候,众人都乖巧坐着。

“老大。”易向晚,“你不是上班么?怎么这会儿就回来了?没有迎新聚餐什么的?”

“聚餐没有,倒是给我排了十五张重症床位。”

“啊,十五张?附一院现在把新人当牲使啊?”

“没事,不用医院那边,今天喊你们过来,是因为我们前期收集的几百份冻存血清样本已经全到位了,irna早筛项目,从今天开始,正式实验阶段。”

此话一,几个人的神瞬间变得严肃。

跟江河混了这么久,他们很清楚这个项目的分量。

江河从包里拿一沓打印好的a4纸,分发给众人。

“这是我这两天来的实验方案,大家先看一看。”

众人接过方案,低翻阅。

江河:“这个项目的前景有多大,我以前跟你们说过,但我今天必须给你们打个预防针,这个过程,会极其枯燥,且充满挫折。”

“简单来说,我们要在血里,找到与瘤相关的irna,目前,针对血清irna的商业化提取试剂盒还不够成熟,我们只能用最基础的方法来。”

江河站起,走到白板前,拿起克笔画了一个简单的程图。

“第一步,rna提取,这是最耗时的一步,也是你们未来几个月每天都要重复的工作。”

“我们手有近六百份血清样本,我要求你们使用trizol ls试剂法来行提取,因为血清中本存在大量的rnase(糖酸酶),如果不迅速裂解,我们的目标rna就会降解得一二净。”

“记住几个心要。”

“第一,绝对的无酶环境,我们的枪、ep必须是去rna酶理过的,台面每天实验前用rnasezap洒后,再用depc拭。”

“第二,加氯仿后的相分离,离心完,取上层相的时候,手千万不要抖,哪怕少一相,也绝不能到中间的白白层,一旦污染,后面的数据全废。”

唐培认真地在方案上着笔记:“老大,提取完之后呢?”

“提取完之后,是逆转录(rt)和实时荧光定量pcr(qpcr)。”

江河写了一个数学公式。

“这是相对定量的计算公式,但因为irna太短了,只有大约22个苷酸,传统的随机引本无法对其行逆转录,所以,我们需要在逆转录之前,行poly(a)加尾,或者使用特异的环(ste-loop)引。”

“现阶段,我们用最基础的加尾法,这些周期、重复的基础提取和建库工作,我今天全分去,两人一组,班倒,一个月,我要看到这六百份样本的cdna文库全建立完毕,听明白了吗?”

顾亦舟严肃:“没问题老大,给我们。”

江河看着手里的实验方案,突然想到副院张随。

张随是国约翰·霍普金斯大学医学院的博士后。

在08年,全球范围在irna循环标志领域走得最前沿的,除了哈佛的几家附属医院,就是约翰·霍普金斯的瘤学团队。

他们是江河这个项目在国际上最大的竞争对手。

想

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